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技術(shù)文章

Technical articles
  • 2020

    11-25

    細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)步驟

    細(xì)胞免疫熒光主要用于蛋白定位研究和細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),細(xì)胞免疫熒光技術(shù)是利用免疫技術(shù)和熒光標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合,原理就是利用抗原-抗體反應(yīng)之后,采用熒光標(biāo)記,標(biāo)記完成后,顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)某種抗原成分的多少,從而做出一個(gè)定位研究,也可以為細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)提供一個(gè)明確的指導(dǎo),細(xì)胞免疫熒光具有敏感性強(qiáng)、特異性高、速度快的特點(diǎn),是目前比較常用的組織學(xué)技術(shù),也是比較準(zhǔn)確的。一、實(shí)驗(yàn)方法原理在進(jìn)行細(xì)胞免疫熒光過(guò)程中,需要用到細(xì)胞爬片,通過(guò)將爬片浸在細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi),細(xì)胞在爬片上生長(zhǎng),進(jìn)而進(jìn)行細(xì)胞的免疫...
  • 2020

    11-3

    進(jìn)口胎牛血清提取制備酶的經(jīng)典方法

    進(jìn)口胎牛血清提取制備酶的經(jīng)典方法,多采用硫酸銨分級(jí)沉淀,胰酶在75%飽和度硫酸銨中沉淀,其它雜蛋白一般在10%硫酸銨飽和度下被沉淀而除去。經(jīng)此多次提取,后在PH8.0peng酸緩沖液中得到結(jié)晶。本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)從豬胰臟中制備胰酶結(jié)晶實(shí)驗(yàn),掌握酶的制備、一般分離、提取、純化和結(jié)晶的操作技術(shù)。同時(shí)為親和層析、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)樣品。1、胰蛋白酶原的提取與分離:稱取1-1.5Kg新鮮豬胰臟,在冰浴下剝除脂肪和結(jié)締組織,在低溫下用絞肉機(jī)絞碎胰臟(或用高速組織勻漿機(jī)搗碎)加1-2倍體積以預(yù)...
  • 2020

    9-28

    恒遠(yuǎn)送你一本ELISA實(shí)驗(yàn)通關(guān)秘籍

    實(shí)驗(yàn)原理:ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。實(shí)驗(yàn)材料:抗原,血清,96孔酶標(biāo)板4℃冰箱,恒溫培養(yǎng)箱,分光光度計(jì)。實(shí)驗(yàn)步驟:一、包被抗原1.用50mM的碳酸鹽包被緩沖液(pH9.6)溶解抗原,使抗原濃度為10-20μg/ml,加100μl/孔到96孔酶標(biāo)板,4℃放置過(guò)夜。2.第二天棄去包被液后,用PBST洗滌3次,每孔加入150μl1%BSA37℃封閉...
  • 2020

    9-23

    恒遠(yuǎn)產(chǎn)品文獻(xiàn):大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒引用文獻(xiàn)

    【文獻(xiàn)標(biāo)題】N-acetylcysteinealleviatesfluoride-inducedtesticularapoptosisbymodulatingIRE1α/JNKsignalingandnuclearNrf2activation【作者】YazhenHu,YaweiWang,TingYan,et.al【作者單位】鄭州大學(xué)(ZhengzhouUniversity)【文獻(xiàn)中引用產(chǎn)品】大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒【關(guān)鍵詞】Fluoride,Apoptosis,Endo...
  • 2020

    9-16

    牛血清的重要功能你清楚嗎?

    一、血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。二、主要功能牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基...
  • 2020

    9-9

    什么是質(zhì)粒轉(zhuǎn)化,如何操作呢?

    1.基本原理將質(zhì)粒DNA導(dǎo)入細(xì)菌的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化(Transformation)。此感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞在CaCl2低滲溶液中膨脹為球狀(感受態(tài)細(xì)菌的制備,見(jiàn)前)。質(zhì)粒DNA與CaCl2形成抗DNase羥基-磷酸鈣復(fù)合物黏附于細(xì)菌表面,經(jīng)42℃短時(shí)間熱沖擊處理,促進(jìn)細(xì)胞吸收DNA復(fù)合物。在豐富培養(yǎng)基上生長(zhǎng)數(shù)小時(shí)后,球狀細(xì)胞復(fù)原并分裂增殖。被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌中,外源基因得到表達(dá)。在選擇性培養(yǎng)平板上,可選出所需的轉(zhuǎn)化子(即含有質(zhì)粒DNA的細(xì)菌)。鈣處理的感受態(tài)細(xì)胞,一般每微克DNA能獲得105...
  • 2020

    8-31

    恒遠(yuǎn)產(chǎn)品文獻(xiàn):大鼠TGF-β、ANGII ELISA試劑盒引用文獻(xiàn)

    【文獻(xiàn)標(biāo)題】EffectofanaqueousextractofAverrhoacarambolaL.onendothelialfunctioninratswithventricularremodelling【作者】XingmeiLianga,RenbinHuangb,JianchunHuanget.al【作者單位】廣西醫(yī)科大學(xué)【文獻(xiàn)中引用產(chǎn)品】大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)ELISA試劑盒大鼠血管緊張素II(ANGII)ELISA試劑盒【關(guān)鍵詞】AEA,Ventricul...
  • 2020

    8-26

    實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌操作注意事項(xiàng)

    1.玻璃器皿的消毒和清潔新購(gòu)玻璃器皿的處理新購(gòu)玻璃器皿應(yīng)用熱肥皂水洗刷,流水沖洗,再用1%~2%鹽酸溶液浸泡,以除去游離堿,再用水沖洗。對(duì)容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等,經(jīng)清水洗凈后應(yīng)注入濃鹽酸少許,慢慢轉(zhuǎn)動(dòng),使鹽酸布滿容器內(nèi)壁數(shù)分鐘后傾出鹽酸,再用水沖洗。2.污染玻璃器皿的處理①一般試管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%shi炭酸浸泡,再煮沸30分鐘,亦可用肥皂或合成洗滌劑洗刷使盡量產(chǎn)生泡沫,然后用清水沖洗至無(wú)肥皂為止。然后用少量蒸餾水沖洗。②細(xì)菌培養(yǎng)用的試管和培養(yǎng)皿可先...
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